Antimicrobial activity of dimeric acylphloroglucinols isolated from southern Brazilian Hypericum species against to resistant bacterial.

The hexanic extracts of Hypericum austrobrasiliense, H. caprifoliatum, H. denudatum, H. pedersenii and H. polyanthemum, and three isolated dimeric acylphloroglucinols (uliginosin B, japonicine A and hyperbrasilol B) were assayed for their antimicrobial activity against some Gram-positive and Gram-negative bacteria (including resistant strains). These extracts were assayed using the disc diffusion test, and the results indicated that the tested species did non exhibit activity on the Gram-negative strains. Subsequently, the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) were measured using the broth dilution technique adopted to macrodillution. The most susceptible strains were the MRSA and the S. aureus MLSb. Regarding these pathogens, the better MIC values were obtained with the extracts from H. austrobrasiliense, H. caprifoliatum and H. pedersenii. The acylphloroglucinols uliginosin B and hyperbrasilol B presented the lowest MIC values against Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, MRSA and S. aureus MLSb resistance.

New Delhi metalobetalactamase (NDM): uma revisão / Metallobetalactamase New Delhi: a review

O surgimento da enzima metalobetalactamase "New Delhi" (NDM-1) incrementou a possibilidade das bactérias se tornarem multirresistentes. Esta betalactamase foi relatada pela primeira vez em 2009, em isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli oriundos de um paciente sueco hospitalizado na Índia. Tendo em vista a ampla resistência desenvolvida por bactérias portadoras do gene blaNDM e seu elevado índice de disseminação, o presente artigo buscou apresentar e discutir aspectos importantes sobre essa metaenzima, como mecanismo de ação, detecção laboratorial, controle de infecção e possibilidades de tratamento.

The emergence of metalobetalactamase enzyme "New Delhi" (NDM-1) increased the chance of bacteria becoming multiresistant. This betalactamase was first reported in 2009 in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli derived from a Swedish patient hospitalized in India. Given the widespread resistance developed by bacteria carrying the gene blaNDM and its high rate of spread, this paper aims to present and discuss important aspects of this metalobetalactamase as mechanism of action, laboratorial detection, infection control and treatment possibilities

Acinetobacter baumannii Multirresistente: Aspectos Clínicos e Epidemiológicos / Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii: Clinical and Epidemiological Aspects

Demonstrar o perfil clínico e epidemiológico dasinfecções associadas à Acinetobacter baumannii produtorde carbapenemases, com enfoque nos relatos descritos noBrasil. Material e Métodos: Este estudo consiste em umarevisão bibliográfica, na qual foram avaliados artigos originaise artigos de revisão publicados em português ou em inglêsentre 2001 e 2013. Após consulta às bases de dadoseletrônicas Pubmed/MEDLINE e SciELO mediante o empregodos descritores “Acinetobacter baumannii”,“carbapenemases”, “infecção”, “epidemiologia”, 33 artigosforam selecionados para análise. Resultados: A. baumanniié um patógeno oportunista comumente associado a surtosde infecções nosocomiais, incluindo pneumonia associada àventilação mecânica, com incidência mais elevada emunidades de terapia intensiva (UTIs). A habilidade destepatógeno em desenvolver mecanismos de resistência limitaa disponibilidade de opções terapêuticas, dificultando otratamento destas infecções e elevando os índices demortalidade. Metalo-beta-lactamases e, maisprevalentemente, oxacilinases são a causa mais preocupantede resistência adquirida a carbapenens neste patógeno. Oprimeiro surto relatado no Brasil ocorreu em 1999 e, desdeentão, houve uma crescente disseminação de clonesepidêmicos desta bactéria no país. Conclusão: A emergênciamundial de cepas de A. baumannii multirresistentesprodutoras de carbapenemases tem se tornado um problemade saúde pública. Portanto, o desenvolvimento de novasopções terapêuticas e a maior ênfase na prevenção detransmissão desta bactéria em meio hospitalar sãoessenciais...

To evaluate the clinical and epidemiological profileof infections associated with carbapenemase-producingAcinetobacter baumannii, focusing on reports described inBrazil. Material and Methods: This study consists of aliterature review evaluating research papers and literaturereviews published in Portuguese or English between 2001and 2013. A total of 33 articles were selected for analysisbased on searches carried out in the databases PubMed andSciELO using the descriptors: “Acinetobacter baumannii”,“carbapenemases”, “infection” and “epidemiology”. Results:A. baumannii is an opportunistic pathogen commonlyassociated with outbreaks of nosocomial infections, includingventilator-associated pneumonia, with higher incidence inintensive care units (ICUs). The ability of this pathogen todevelop resistance mechanisms limits the availability oftreatment options, making it difficult to treat these infectionsand increasing mortality rates. Metallo-beta-lactamases and,more prevalently, oxacilinases are the most worrisome causeof acquired resistance to carbapenens in this pathogen. Thefirst outbreak reported in Brazil occurred in 1999 and sincethen there has been a growing spread of epidemic clones ofthis bacterium in the country. Conclusion: The worldwideemergence of multi-drug resistant strains of carbapenemaseproducingA. baumannii has become a public health problem.Therefore, the development of new therapeutic options anda greater emphasis on prevention of transmission of thisbacterium in the hospital setting are essential...

Resistance to amoxicillin, clarithromycin and ciprofloxacin of Helicobacter pylori isolated from Southern Brazil patients.

INTRODUCTION: Helicobacter pylori is a bacteria which infects half the world population and is an important cause of gastric cancer. The eradication therapy is not always effective because resistance to antimicrobials may occur. The aim of this study was to determine the susceptibility profile of H. pylori to amoxicillin, clarithromycin and ciprofloxacin in the population of Southern Brazil. MATERIAL AND METHODS: Fifty four samples of H. pylori were evaluated. The antibiotics susceptibility was determined according to the guidelines of the British Society for Antimicrobial Chemotherapy and the Comité de l'Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie. RESULTS: Six (11.1%) H. pylori isolates were resistant to clarithromycin, one (1.9%) to amoxicillin and three (5.5%) to ciprofloxacin. These indices of resistance are considered satisfactory and show that all of these antibiotics can be used in the empirical therapy. CONCLUSION: The antibiotics amoxicillin and clarithromycin are still a good option for first line anti-H. pylori treatment in the population of Southern Brazil.

RESISTANCE TO AMOXICILLIN, CLARITHROMYCIN AND CIPROFLOXACIN OF Helicobacter pylori ISOLATED FROM SOUTHERN BRAZIL PATIENTS / Resistência à amoxicilina, claritromicina e ciprofloxacina de Helicobacter pylori isolados de pacientes do Sul do Brasil

Introduction: Helicobacter pylori is a bacteria which infects half the world population and is an important cause of gastric cancer. The eradication therapy is not always effective because resistance to antimicrobials may occur. The aim of this study was to determine the susceptibility profile of H. pylori to amoxicillin, clarithromycin and ciprofloxacin in the population of Southern Brazil. Material and methods: Fifty four samples of H. pylori were evaluated. The antibiotics susceptibility was determined according to the guidelines of the British Society for Antimicrobial Chemotherapy and the Comité de l'Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie. Results: Six (11.1%) H. pylori isolates were resistant to clarithromycin, one (1.9%) to amoxicillin and three (5.5%) to ciprofloxacin. These indices of resistance are considered satisfactory and show that all of these antibiotics can be used in the empirical therapy. Conclusion: The antibiotics amoxicillin and clarithromycin are still a good option for first line anti-H. pylori treatment in the population of Southern Brazil.

Introdução: Helicobacter pylori é uma bactéria que infecta metade da população mundial e é considerada importante causa de câncer gástrico. A terapia de erradicação nem sempre é eficaz, pois pode ocorrer a resistência aos antimicrobianos. Este estudo determinou a sensibilidade de H. pylori frente à amoxicilina, claritromicina e ciprofloxacina na população do Sul do Brasil. Material e métodos: Foram avaliadas 54 amostras de H. pylori. A sensibilidade aos antibióticos foi determinada segundo as orientações da British Society for Antimicrobial Chemotherapy e do Comité de l'Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie. Resultados e discussão: Sete (13%) isolados de H. pylori foram resistentes à claritromicina, um (1,9%) à amoxicilina e três (5,5%) à ciprofloxacina. Estes índices são satisfatórios e demonstram que esses antibióticos podem ser utilizados na terapia empírica. Conclusão: Os antibióticos amoxicilina e claritromicina ainda são uma boa opção no tratamento de primeira linha anti-H. pylori na população do Sul do Brasil.

Evaluation of the pharmacological activity of the Alternanthera brasiliana aqueous extract.

CONTEXT: Alternanthera brasiliana (L.) Kuntze (Amarantaceae) is widely used in Brazilian traditional medicine as an analgesic, anti-inflammatory and antibacterial. OBJECTIVE: To investigate the potential anti-inflammatory, analgesic, anxiolytic, and locomotor effect of the infusions in preclinical models. MATERIALS AND METHODS: Anti-inflammatory activity was evaluated by a carrageenan-induced pleurisy test in Wistar rats (200 and 400 mg/kg, n = 6-7). Analgesic activity was evaluated by the number of abdominal contractions induced by 0.6% acetic acid administered to Swiss mice (25, 50, 100, 200, and 400 mg/kg, n = 10). Effects on the central nervous system (CNS) were evaluated in Wistar rats (100, 200, and 400 mg/kg, n = 10) using open field and plus maze models. RESULTS AND DISCUSSION: Possible anti-inflammatory activity was indicated by the significant reduction of 19.8% for 200 mg/kg (p < 0.05) and 23.9% for 400 mg/kg (p < 0.05) of polymorphonuclear cells in pleural exudate. Analgesic activity was suggested by the significant reduction (p < 0.01) of number of abdominal contractions for all doses under study. No anxiolytic effect was noted, but there was an increase in the number of rearings in the group of rats treated with 100 mg/kg dose (p < 0.05). CONCLUSIONS: Our findings suggest that the aqueous extract of the leaves of A. brasiliana has a potential pharmacological effect on inflammation and pain.

Métodos alternativos para detecção de betalactamase de espectro estendido em Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae / Alternative methods for the detection of extended-spectrum-beta-lactamase in Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae

INTRODUÇÃO: A resistência a antimicrobianos tem aumentado rapidamente nos últimos anos no Brasil e no mundo e, embora exista uma variedade de mecanismos de resistência, destaca-se a produção de betalactamase de espectro estendido (ESBL) como um dos principais. Essas enzimas são mediadas por plasmídios, conferem resistência a vários antimicrobianos betalactâmicos e são inibidas por compostos, como ácido clavulânico, sulbactam e tazobactam. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi comparar metodologias alternativas à técnica padrão preconizada pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) para detecção de ESBL. MATERIAL E MÉTODO: Foram realizados testes com 36 isolados (26 de E. coli e 10 de K. pneumoniae) mediante disco combinado (CLSI) e técnicas alternativas designadas meio disco (MD) e substituição de discos (SD). CONCLUSÃO: As duas metodologias propostas apresentaram resultados satisfatórios com sensibilidade superior a 90 por cento e custo inferior à técnica de referência (disco combinado), podendo ser utilizadas na pesquisa de ESBL.

INTRODUCTION: Antimicrobial resistance has increased apace in Brazil and worldwide in the last years, even though there is a great variety of resistance mechanisms and extended spectrum beta-lactamases (ESBL) is among the main ones. These enzymes are plasmid mediated, which causes resistance to some beta-lactam antimicrobials and are inhibited by compounds such as clavulanic acid, sulbactam and tazobactam. OBJECTIVE: The objective of this study was to compare alternative methods to the standard ESBL detection technique recommended by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). MATERIAL AND METHOD: Tests with 36 isolates (26 E. coli and 10 K. pneumoniae) were performed by means of CLSI disk diffusion method and alternative techniques designated as half disk (HD) and disk substitution (SD). CONCLUSION: Both methods yielded satisfactory results with higher sensitivity (90 percent) and lower costs in comparison with the reference one (CLSI disk diffusion method), which corroborates its use in ESBL investigation.

Comparação de métodos na determinação de sensibilidade à vancomicina em Staphylococcus aureus resistente à meticilina / Comparison of methods to determination of vancomycin sensivity in methicillin-resistant Staphylococcus aureus

INTRODUÇÃO: Infecções por Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) são cada vez mais comuns, tanto em ambiente hospitalar como na comunidade. O principal antimicrobiano utilizado no tratamento de infecções causadas por MRSA é a vancomicina e devido ao seu uso indiscriminado surgiram cepas com sensibilidade diminuída. A partir de 2009 foi estabelecido que o teste de sensibilidade à vancomicina deve ser feito por métodos de concentração inibitória mínima (MIC). Por isso, este trabalho teve por objetivo determinar a sensibilidade à vancomicina em cepas MRSA por meio de diferentes metodologias, comparando os valores de MIC obtidos. METODOLOGIA: Foram analisadas 46 cepas de S. aureus resistentes à oxacilina provenientes do Hospital Mãe de Deus, de Porto Alegre, Rio Grande do Sul. As técnicas de MIC empregadas foram macrodiluição em caldo, método comercial Etest® e automação Microscan Walk Away (Siemens®). RESULTADOS: Todas as cepas foram sensíveis à vancomicina mediante todas as metodologias, contudo o Etest® apresentou valores de MIC mais elevados quando em comparação com a macrodiluição. A automação teve resultados equivalentes aos demais métodos por apresentar o valor de sensível como < 2 µg/ml. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO: O método comercial Etest® superestima a MIC, porém é fácil e rápido de ser realizado; já a macrodiluição em caldo é uma metodologia muito trabalhosa e demorada. Os resultados do Microscan Walk Away 96 (Siemens®) são precisos, mas não fornecem o valor exato da MIC, exigindo um teste adicional para avaliar a eficácia do tratamento. Em conclusão, o Etest® pode ser utilizado como uma alternativa na rotina laboratorial.

INTRODUCTION: Methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections are increasing, both in hospitals and the community. Vancomycin is the main antibiotic used to treat MRSA infections and this widespread use led to the emergence of isolates with reduced susceptibility. Since 2009 it was established that the susceptibility test to vancomycin should be determined using minimum inhibitory concentration (MIC). OBJECTIVE: Based on the above, this study aimed to determine vancomycin susceptibility in MRSA isolates comparing antimicrobial susceptibility methods recommended by Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). METHODOLOGY: We analyzed 46 isolates of S. aureus resistant to methicillin from Mãe de Deus Hospital, in Porto Alegre, Brazil. MICs for S. aureus isolates were determined using Etest® strips and were correlated with broth macrodilution method, Etest® and MicroScan Walk Away 96 (Siemens®). RESULTS: All strains were susceptible to vancomycin by all methods, however, the Etest® strips showed higher MIC values compared with broth macrodilution. MicroScan Walk Away 96 (Siemens®) shows similar results compared with other methods for presenting the value of sensitive as < 2 µg/ml. DISCUSSION AND CONCLUSION: The Etest® method overestimates the MIC values, however it is easily and quickly accomplished. In the other hand, broth macrodilution is very laborious and time consuming. MicroScan Walk Away 96 (Siemens®) results are accurate, but does not provide the exact MIC value requiring an additional test to estimate the effectiveness of treatment. In conclusion, the Etest® can be used as an alternative for routine monitoring.

Fenótipos de betalactamases em Klebsiella pneumoniae de hospital de emergência de Porto Alegre / Phenotypes of beta-lactamases in Klebsiella pneumoniae from emergency hospital of Porto Alegre

INTRODUÇÃO: Mundialmente, o crescente aumento de infecções hospitalares gera a necessidade de estudos na área de resistência bacteriana. Uma das bactérias Gram-negativas de maior prevalência no ambiente nosocomial é a Klebsiella pneumoniae, capaz de expressar uma diversidade de enzimas de resistência, justificando seu monitoramento constante. OBJETIVO: Analisar a frequência fenotípica das enzimas betalactamases de espectro estendido (ESBL), cromossômicas (AmpC) plasmidial, metalobetalactamase (MBL) e Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) oriundas de hospital de emergência em Porto Alegre (RS). MATERIAL E MÉTODO: Foram incluídos no estudo 58 isolados bacterianos com sensibilidade diminuída a cefalosporinas de terceira geração e/ou a cefoxitina. Nestas, foram aplicados os testes de disco-difusão compatíveis para as respectivas betalactamases. RESULTADOS: Encontrou-se elevada frequência de ESBL (48,3 por cento), seguida por ESBL simultânea à AmpC plasmidial (15,5 por cento), além de duas cepas com carbapenemases. DISCUSSÃO: O elevado índice de ESBL e ESBL/AmpC conduz à necessidade de uso terapêutico de carbapenens. Consequentemente, o uso massivo desses fármacos gera pressão seletiva que favorece o aparecimento de cepas mais resistentes, como as produtoras de carbapenemases (KPC e/ou MBL). As carbapenemases são muito relevantes devido à limitação terapêutica inerente e por seu potencial de disseminação. A resistência a todos os fármacos betalactâmicos usados no screening por disco-difusão pode ser um "sinalizador" laboratorial para a presença desses relevantes mecanismos de resistência. CONCLUSÃO: A pesquisa de fenótipos de resistência em Klebsiella é ferramenta fácil e exequível nos laboratórios de microbiologia, além de ser fundamental para o conhecimento da epidemiologia local das betalactamases, possibilitando a adequação da terapia antimicrobiana mais conveniente.

INTRODUCTION: Worldwide, the incidence of nosocomial infections raises the studies of bacterial resistance. Klebsiella pneumoniae is a Gram-negative bacteria most prevalent in the nosocomial environment, capable of expressing a variety of resistance enzymes, justifying their continued monitoring. OBJECTIVE: We sought to determine the frequency of beta-lactamases ESBL, AmpC plasmid, MBL and KPC in K. pneumoniae strains from emergency hospital in Porto Alegre (RS). MATERIAL AND METHOD: Fifty-eight bacterial isolates K. pneumoniae with reduced susceptibility to third generation cephalosporins and/or cefoxitin were included in this study. Phenotypic detection of beta-lactamases was carried out by using specific tests for ESBL, AmpC plasmid, KPC and MBL. RESULTS: Were detected a high frequency of ESBL (48.3 percent), followed by the AmpC plasmid/ESBL (15.5 percent), and two carbapenemase strains. DISCUSSION: The high rates of ESBL and ESBL/AmpC leads to the therapeutic use of carbapenens. Consequently, the massive use of carbapenens creates selective pressure favoring the more resistant strains, such as carbapenemase producing (KPC and/or MBL). The carbapenemase is very relevant due to the inherent therapeutic limitation, as well as their potential to spread. The resistance to all beta-lactam drugs used in the screening by disk diffusion can be a "flag" laboratory for presence of relevant mechanisms of resistance. CONCLUSION: Research of resistance phenotypes in Klebsiella is easy and feasible tool in microbiology laboratories, and is fundamental to understanding the local epidemiology of beta-lactamases, allowing the appropriateness of antimicrobial therapy more convenient.

[Investigation of metallo-beta-lactamase-producing Acinetobacter sp and Pseudomonas aeruginosa at an emergency hospital in Porto Alegre, State of Rio Grande do Sul, Brazil]. / Pesquisa de Acinetobacter sp e Pseudomonas aeruginosa produtores de metalo-beta-lactamase em hospital de emergência de Porto Alegre, Estado do Rio Grande do Sul, Brasil.

INTRODUCTION: The appearance of metallo-beta-lactamase (MBL)-producing Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter sp. is a challenge for hospitals. METHODS: The production of MBL in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter sp. From an emergency hospital in Porto Alegre was investigated using the disk approximation test and MBL E-test. The bla genes were determined using PCR. RESULTS: Two strains of Pseudomonas aeruginosa and eight of Acinetobacter sp were shown to be MBL phenotypes. Amplification of the blaSPM-1 gene confirmed the presence of the enzyme in P. aeruginosa. CONCLUSIONS: Caution is needed in evaluating phenotype tests used for routine detection of metallo-beta-lactamases.

Pesquisa de Acinetobacter sp e Pseudomonas aeruginosa produtores de metalo-β-lactamase em hospital de emergência de Porto Alegre, Estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Investigation of metallo-β-lactamase-producing Acinetobacter sp and Pseudomonas aeruginosa at an emergency hospital in Porto Alegre, State of Rio Grande do Sul, Brazil

INTRODUÇÃO: O aparecimento de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter sp produtores de metalo-β-lactamases (MBLs) é um desafio para os hospitais. MÉTODOS: Verificou-se a produção de MBL em cepas clínicas de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter sp de um hospital de emergência de Porto Alegre pelo método de aproximação de disco e E-test MBL. Os genes bla foram pesquisados pela PCR. RESULTADOS: Duas cepas de Pseudomonas aeruginosa e oito Acinetobacter sp demonstraram fenótipo de MBLs. A amplificação do gene blaSPM-1 confirmou a enzima em P. aeruginosa.. CONCLUSÕES: Deve-se ter cautela ao avaliar testes fenotípicos utilizados na detecção rotineira de metalo-enzima.

INTRODUCTION: The appearance of metallo-β-lactamase (MBL)-producing Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter sp. is a challenge for hospitals. METHODS: The production of MBL in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter sp. From an emergency hospital in Porto Alegre was investigated using the disk approximation test and MBL E-test. The bla genes were determined using PCR. RESULTS: Two strains of Pseudomonas aeruginosa and eight of Acinetobacter sp were shown to be MBL phenotypes. Amplification of the blaSPM-1 gene confirmed the presence of the enzyme in P. aeruginosa. CONCLUSIONS: Caution is needed in evaluating phenotype tests used for routine detection of metallo-β-lactamases.

Detecção fenotípica de metalobetalactamase em isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa de hospitais de Caxias do Sul / Detection of phenotypic metallo-beta-lactamase in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa from hospitals in Caxias do Sul

INTRODUÇÃO: Entre os principais microrganismos causadores de infecções nosocomiais destacam-se bacilos Gram-negativos não fermentadores de glicose, como Pseudomonas aeruginosa. O desenvolvimento de mecanismos de resistência por estes patógenos, como a produção de metalobetalactamases (MBL), causa grande preocupação no âmbito hospitalar. OBJETIVO: Determinar a prevalência do fenótipo MBL em amostras de P. aeruginosa isoladas de hospitais de Caxias do Sul (RS) e comparar alguns métodos fenotípicos empregados para a detecção dessa enzima. MATERIAL E MÉTODOS: Um total de 50 amostras de P. aeruginosa com sensibilidade diminuída à ceftazidima foi submetido à avaliação fenotípica quanto à produção de MBL por meio de três testes: aproximação de discos, disco combinado e E-test MBL, empregando diferentes substratos e inibidores da metaloenzima. RESULTADOS: A produção de MBL foi verificada em 15 amostras (30 por cento). O método que apresentou maior percentual de resultados positivos foi o E-test MBL, seguido do teste de disco combinado de ceftazidima com ácido etilenodiaminotetracético (EDTA). CONCLUSÃO: A presença de MBL é um importante mecanismo de resistência encontrado nos hospitais participantes do estudo, demonstrando a necessidade da detecção dessas enzimas a fim de controlar a disseminação dos genes de resistência e proporcionar terapia adequada ao paciente.

INTRODUCTION: Non-fermenting Gram-negative bacilli, such as Pseudomonas aeruginosa, feature among the main microorganisms that cause nosocomial infections. The development of resistance mechanisms, such as the production of metallo-beta-lactamases (MBL), is a major concern in hospitals. OBJECTIVES: To determine the prevalence of MBL phenotype in samples of P. aeruginosa isolates from hospitals in Caxias do Sul (RS) and compare some phenotypic methods applied in this enzyme detection. MATERIAL AND METHODS: A total of 50 samples of P. aeruginosa with decreased susceptibility to ceftazidime were phenotypically evaluated as to MBL production by three tests: double-disk synergy, combined disk and MBL E-test, using different substrates and metallo-enzyme inhibitors. RESULTS: The production of MBL was detected in 15 samples (30 percent). The method showing higher percentage of positive results was the MBL E-test, followed by ceftazidime-EDTA disk method. CONCLUSION: The presence of MBL is an important resistance mechanism found in the studied hospitals, which substantiate the need for the detection of these enzymes in order to control the spread of resistance genes and provide appropriate therapy to the patient.

Avaliação fenotípica da enzima Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) em Enterobacteriaceae de ambiente hospitalar / Phenotypic research on Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) enzyme in Enterobacteriaceae from hospitals

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: A resistência bacteriana é problema frequente e importante no ambiente nosocomial. Nesse contexto, várias bactérias apresentam habilidade de desenvolver mecanismos de resistência enzimáticos, destacando-se as Enterobacteriaceae. Nesta família de microrganismos, a produção de Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) é um mecanismo emergente, o que justifica sua vigilância constante. MATERIAL E MÉTODO: Este trabalho pesquisou o fenótipo de KPC em 30 isolados clínicos de enterobactérias resistentes a cefalosporinas de terceira geração e sensibilidade diminuída a carbapenem oriundas de dois hospitais (em Porto Alegre e na Grande Porto Alegre, RS). Realizou-se discodifusão com imipenem, meropenem e ertapenem, e 14 cepas com halo < 22 mm para o último antimicrobiano foram submetidas ao teste de Hodge modificado. RESULTADOS: Nenhuma amostra apresentou carbapenemase (Hodge negativo). DISCUSSÃO: Apesar de não ter sido detectada carbapenemase, a resistência aos carbapenens possivelmente pode ser atribuída à presença de betalactamases cromossômicas (AmpC) e/ ou de amplo espectro (ESBL) associada à alteração de permeabilidade nos canais de porina. CONCLUSÃO: Considerando o caráter emergente da KPC, torna-se importante seu rastreamento em isolados de enterobactérias com sensibilidade diminuída ao ertapenem.

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Bacterial resistance is a frequent and important problem in the nosocomial environment. In this context, several bacteria have the ability to develop mechanisms of enzymatic resistance, mainly Enterobacteriaceae. In this family of microorganisms, the production of Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) is an emerging mechanism, which should be under constant observation. MATERIAL AND METHOD: This study investigated the phenotype of KPC in 30 clinical isolates of Enterobacteriaceae resistant to third generation cephalosporin and carbapenem from two hospitals (Porto Alegre city and Porto Alegre, RS). It was performed disk diffusion method with imipenem, meropenem and ertapenem. Additionally, 14 strains with halo < 22 mm for the last antimicrobial agent underwent modified Hodge test. RESULTS: No sample showed carbapenemase (Hodge negative). DISCUSSION: Despite the fact there was no carbapenemase, resistance to carbapenems is possibly attributed to the presence of beta-lactamases AmpC and/or ESBL associated with changes in the permeability of porin channels. CONCLUSION: Given the emerging nature of KPC, it is important to trace it in Enterobacteriaceae isolates with decreased susceptibility to ertapenem.

[Conjunctivitis due to Achromobacter xylosoxidans: case report]. / Conjuntivite por Achromobacter xylosoxidans: relato de caso.

We report here a case of conjunctivitis in an immunocompetent patient due to Achromobacter xylosoxidans, which was associated with the use of rigid contact lenses. The bacteria were isolated from the scraped conjunctival swab as well as from the lens cleaning fluid. A. xylosoxidans is an opportunistic pathogen, especially in immunocompromised patients; however, in isolates of ocular infections, from immunocompetent patients, it may be confused with other gram-negative organisms, particularly Pseudomonas aeruginosa. Due to an increased resistance against different antimicrobial agents, A. xylosoxidans must be fully identified and differentiated from other gram-negative isolates from ocular infections.

Conjuntivite por Achromobacter xylosoxidans: relato de caso / Conjunctivitis due to Achromobacter xylosoxidans: case report

Relatamos um caso de conjuntivite ocasionada por Achromobacter xylosoxidans em paciente imunocompetente usuária de lentes de contato rígidas. A bactéria foi isolada da solução utilizada para a desinfecção das lentes bem como do raspado conjuntival. A. xylosoxidans tem sido descrita em infecções oportunistas em pacientes imunodeprimidos, contudo pode ser confundida com outros bacilos gram-negativos, principalmente Pseudomonas aeruginosa, isoladas de infecções oculares em pacientes imunocompetentes. Devido ao reduzido perfil de sensibilidade aos antimicrobianos demonstrado pelo A. xylosoxidans, torna-se importante a identificação deste agente etiológico em quadros de conjuntivite.

We report here a case of conjunctivitis in an immunocompetent patient due to Achromobacter xylosoxidans, which was associated with the use of rigid contact lenses. The bacteria were isolated from the scraped conjunctival swab as well as from the lens cleaning fluid. A. xylosoxidans is an opportunistic pathogen, especially in immunocompromised patients; however, in isolates of ocular infections, from immunocompetent patients, it may be confused with other gram-negative organisms, particularly Pseudomonas aeruginosa. Due to an increased resistance against different antimicrobial agents, A. xylosoxidans must be fully identified and differentiated from other gram-negative isolates from ocular infections.

Metalo-beta-lactamase e Pseudomonas aeruginosa / Metallo-beta-lactamase and Pseudomonas aeruginosa

Dentre a variedade de microrganismos comunitários e nosocomiais responsáveis por infecções, os mais relevantes são bactérias como as não-fermentadoras, especialmente Pseudomonas aeruginosa. Devido a sua facilidade de troca de informações genéticas, ela adquire determinantes de resistência importantes como, por exemplo, genes que codificam enzimas metalo-β-lactamases (MβLs). Essa família de enzimas, pertencente à classificação B de Ambler, é muito diversificada (VIM, IMP, SPM, GIM e SIM) e sua expressão resulta na inativação de drogas como os carbapenens que, geralmente são opção terapêutica em infecções por esta bactéria. Contudo, quando tal enzima está presente, estes antimicrobianos não tem ação. Diante disso, a terapia torna-se limitada, podendo ser utilizada a polimixina B ou colistina, extremamente tóxicas. A MβL mais freqüente no mundo é a VIM-2 e no Brasil a mais prevalente é a SPM-1. O CLSI (Clinical and Laboratory Standard Institute) ainda não padronizou a detecção de MβL e a pesquisa destaenzima vem sendo feita através de testes fenotípicos ou moleculares. Entre os ensaios fenotípicos destacam-se os de disco-aproximação com agentes quelantes como o EDTA ou 2-MPA juntamente com imipenem e ceftazidima. Outros testes vêm sendo propostos, como o EIM (EDTA-imipenem microbiological assay). Os testes moleculares são importantes, mas realizados em menor escala devidoà necessidade de investimento em equipamentos e pessoal treinado. A confirmação de MβL nos isolados de P. aeruginosa não é realizada rotineiramente, mas é importante para o conhecimento da epidemiologia local desta enzima.

Among the variety of nosocomial and community acquired microorganisms responsible for infections, the most relevant are bacterias like non-fermenting, especially Pseudomonas aeruginosa. Due to its ease-of-trade genetic information, it acquires some important resistance as, for example, genes that codify metallo-β-lactamases (MβL) enzyme. This enzyme family, which belongs to AmblerB classification, is very diversified (VIM, IMP, SPM, GIM e SIM) and its expression results in the inactivation of drugs as carbapenems, that usually are the therapeutic option in infections by this bacteria. However, when this enzyme is into the bacteria, theseantimicrobial don’t have action. According to this, the therapy becomes limited to the use of polimixin B or colistin, extremely toxic drugs. The most common MβL in the world is VIM-2 and in Brazil the most prevalent is SPM-1. CLSI (Clinical and Laboratory StandardInstitute) haven’t standardized the detection of MβL and the research of this enzyme is done by phonotypical or molecular tests. Among the phenotypic tests it stands out the disc-approximation test with chelant agents as EDTA or 2-MPA together with imipenem and ceftazidim. Other tests are being proposed, as the EIM (EDTA-imipenem microbiological assay). The molecular tests are important, but are much less done due to its need of investment in equipment and trained personnel. The confirmation of MβL in P. aeruginosa isolated is not done in the routine, but it’s important to the knowledge of the local epidemiology of this enzyme.

Staphylococcus em um hospital de Porto Alegre (RS) / Staphylococcus in a hospital of Porto Alegre (RS)

Este estudo avaliou a prevalência de Staphylococcus isolados durante um ano em diferentes espécimes clínicos de pacientes internados no Hospital Divina Providência, Porto Alegre, RS. Quanto ao Staphylococcus aureus resistente à oxacilina (MRSA), a taxa mais alta foi observada nos pacientes que estavam internados nos andares (HDP), representando mais que o dobro das infecções do Centro de Terapia Intensiva (CTI). Os Staphylococcus coagulase negativo (SCN) são freqüentes contaminantes, mas constatou-se um aumento de sua participação como agente etiológico em bacteremias, tendo sido isolado em 52,6% das amostras de sangue. Umachado importante foi que, entre todos os SCN isolados, 81,4% apresentaram resistência à oxacilina (MRSCN). Faz-se importante a identificação das espécies de SCN uma vez que é possível o isolamento de S. lugdunensis, uma bactéria que deve ser consideradaequivalente ao S. aureus e também realizar a pesquisa de resistência a oxacilina de modo adequado. Assim, o tratamento pode ser conduzido de modo correto, sem subestimar a prevalência deste Staphylococcus coagulase negativo e a resistência a oxacilina.

This study evaluated the prevalence of Staphylococcus isolates during one year in samples of patients of the Divina Providencia Hospital, Porto Alegre, RS. The rate highest of MRSA was observed in the patients who were interned in the floors (HDP), representing more than the double of the infections of the CTI. The SCN are more frequent as contaminants and evidenced an increase of its participation as etiologic agent, mainly, in blood infection being isolated in 52,6% of the samples of blood. An important finding was that, between all the isolates SCN, 81,4% of them had presented resistance to the oxacilin (MRSCN). The identification of the species of SCN becomes important a time that is possible the isolation of S. lugdunensis, a bacterium that must be considered equivalent to the S. aureus. Thus, the treatment can be lead in adjusted way, without to devaluate the prevalence of this Staphylococcus coagulase negative.

Disco-aproximação e E-teste na pesquisa de enterobactérias produtoras de Beta-lactamase de espectro estendido (ESBL) / Double-disk synergy and E-test in the producing research of enterobacteriaceae of extended-spectrum- beta-lactamase (ESBL)

Atualmente, diferentes bactérias vêm apresentando mecanismos de resistência aos antimicrobianos, destacando-se aqueles associados à produção enzimática. Segundo vários autores, as enterobactérias produtoras de beta-lactamase de espectro estendido(ESBL) continuam proliferando-se rapidamente. Essas enzimas são plamídeo-mediadas e conferem resistência a vários antimicrobianosbeta-lactâmicos. De um total de 60 isolados de bactérias resistentes à cefalotina, obtidos em laboratório de Novo Hamburgo (RS), 23,3% foram positivos nos testes fenotípicos para pesquisa da enzima (classe A de Ambler). Foram empregados, simultaneamente, fitas de E-teste e aproximação de discos, conforme proposto por Jarlier e colaboradores (1988). A última metodologia ofereceu resultados equivalentes ao E-teste, com a vantagem de custo muito inferior. Até o momento da execução deste estudo as amostras não eram triadas nem confirmadas para tal enzima, possibilitando, em cerca de 20% dos pacientes, desfecho clínico não favorável como conseqüência de tratamento inadequado.

Currently different bacteria are showing resistance mechanisms to antimicrobial, especially those associated with enzymeproduction. According to several authors, the species of Enterobacteriaceae family producers of extended-spectrum-beta-lactamase(ESBL) remain proliferating quickly. These enzymes are plasmid mediated and confer resistance to various beta-lactams antimicrobial agents. Within a total of 60 isolates of bacteria resistant to cefalotin, obtained in a hospital of the city of Novo Hamburgo (RS), 23,3% were positive in tests for phenotypic search of the enzyme (class A of Ambler). They had been employees, simultaneously, E-test and double-disk synergy, as considered for Jarlier and collaborators (1988). The last methodology offers resulted equivalents to the E-test with the advantage of very inferior cost. So far the execution of this study, the samples were not screened or confirmed for this enzyme, leading in about 20% of patients, not favorable clinical outcome as a result of inadequate treatment.

[Aerobic bacterial microbiota of the conjunctiva of cornea donors]. / Microbiota bacteriana aeróbia da conjuntiva de doadores de córnea.

PURPOSE: To determine aerobic bacterial microbiota of the conjunctiva of cornea donors and its patterns of susceptibility to antibiotics; verify the number of corneas used for transplant and the average time of preservation in solutions with gentamicin and streptomycin; trace the profile of donors and receptors of cornea. METHODS: Clinical specimens were collected from the inferior bag of the conjunctiva of both eyes of 40 cornea donors. The samples were inoculated into acid blood, chocolate and MacConkey agars, and the antibiogram was performed by the Kirby-Bauer method. RESULTS: The frequency of positive cultures of the conjunctiva of cornea donors was 72.5%, with Gram-positive totalling 81.6% and only 18.4% of the samples were identified as Gram-negative. Vancomycin inhibited 100% of Gram-positive microorganisms, while sensitivity of the Gram-negative to gentamicin was 53.8% and to streptomycin 30%. Most donors and recipients were men, the average time between death and enucleation was approximately 2 hours and preservation in solution with gentamicin and streptomycin was around 7 days. Neoplasms and more than one associated cause were the most frequently causes of death. Keratoconus was the main indication for transplant (51.7%). CONCLUSIONS: Coagulase-negative Staphylococcus was the most frequently isolated microorganism, presenting variable sensitivity to antimicrobians. The amount of corneas used for transplant was below the number of available corneas. Donor and receptor profiles were very heterogeneous regarding most of the analyzed variables.

Staphylococcus aureus oxacilina resistente (MRSA): incidência de cepas adquiridas na comunidade (CA-MRSA) e importÂncia da pesquisa e descolonização em hospital / Resistent oxacilin Staphylococcus aureus (MRSA): incidence of cepas acquired in the community (CA-MRSA) and importance of research and descolonization in hospital

Staphylococcus aureus resistente à oxacilina (MRSA) é um dos maiores problemas clínicos e epidemiológicos em infecções nosocomiais. Porém, as infecções por MRSA não se limitam ao ambiente hospitalar, pois S. aureus resistente à oxacilina, comunidade adquirido, (CA-MRSA) está emergindo e pode atingir pessoas sem fatores de risco, como hospitalizações prévias. Para estimara extensão de CA-MRSA determinou-se a prevalência da colonização nasal por S. aureus em 100 amostras obtidas de uma população sem fatores de risco. As amostras foram semeadas em Agar Sangue e identificadas com provas compatíveis. Nos isolados de S. aureus aplicou-se o teste de sensibilidade aos antimicrobianos por disco-difusão (Kirby-Bauer). Encontrou-se uma freqüência de40% dessa bactéria, sendo 7,5% CA-MRSA. Quanto ao perfil de sensibilidade, S. aureus apresentou tendência à resistência aos lactâmicos e macrolídeos e sensibilidade diminuída à tetraciclina, licosaminas, aminoglicosídeos e cloranfenicol, sendo totalmente sensível aos glicopeptídeos. Os isolados de CA-MRSA apresentaram resistência apenas aos alfa-lactâmicos e macrolídeos. A prevalência da colonização por MRSA em pessoas saudáveis na comunidade potencializa a necessidade de uma maior vigilância do controle de infecção hospitalar, já que esta população que carreia CA-MRSA pode tornar-se reservatório bacteriano no ambiente hospitalar.

Resistant oxacilina Staphylococcus aureus (MRSA) is one of the biggest clinical and epidemiologic problems in nosocomial infections. However, the infections by MRSA are not limited to hospital environment; because community acquired resistant oxacilin S. aureus (CA-MRSA) is emerging and can reach people without risk factors, as previous hospitalizations. To estimate the extension of CA-MRSA prevalence nasal settling for S. aureus was determined in 100 samples of a population without risk factors. The samples were sown in Agar Blood and identified with compatible tests. In isolated of S. aureus the test of sensitivity to antimicrobials for record-diffusion was applied (Kirby-Bauer). A frequency of 40% of these bacteria, being 7.5% CA-MRSA was found. As the sensitivity profile, S. aureus presented trend to resistance to ‚-lactamics and Macrolides and sensitivity diminished to tetracycline, lycosamines, aminoglicosides and chloramphenicol, being total sensible to the glycopeptides. The isolated of CA-MRSA presented resistance only to the ‚-lactamics and macrolides. The prevalence of the settling for MRSA in healthful people in the community increases the need of a bigger control of hospital infection, once this population that carries CA-MRSA may become bacterial reservoir in hospital environment.